离心超滤管浓缩样品

2.1  浓缩样品
1、要浓缩的样品含盐量必须0.3M以上,含盐量低的样品须补加到0.3MNaCl。
2、在内管(附有3KD膜)中加入500µl样品,将内管套入外管。
3、对称放置离心管,14520rpm(即14000g)离心。(离心5min约浓缩2倍,10min约4倍,15min约6倍,20min约8倍,30min约10倍)。
4、离心结束后,将内管倒置套在另一个干净的离心管呢,3880rpm离心min收集浓缩后的样品。或者用移液器直接吸出内管中的样品。
2.2  浓缩管使用后的处理和保存
1、使用完的浓缩管,立即加入500µl含1MNaCl的缓冲液(此缓冲液与浓缩样品的缓冲液一致),8000rpm离心20min。
2、甩净内管中的盐溶液,将内管放入超纯水中浸泡1h。
3、内管加入超纯水500µl,8000rpm离心5min。
4、甩净内管中的水,加入500µl0.2MNaOH,8000rpm离心20min。
5、甩净内管中的NaOH溶液,用超纯水再8000rpm离心5min。
6、甩净内管中的水,放入含0.2-0.5‰NaN3的生理盐水中。
7、外管用自来水洗净后,用超纯水冲洗干净,晾干。

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