1仪器与试药
TU一1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，数显
恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司)，TB一215D型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，LD-02型二两装高速中药粉碎机(中G温岭市大海药材器械厂)，RE一52A型
旋转蒸发仪(
上海亚荣生化仪器厂)；麦冬果实采于济宁医学院日照校区，经济宁医学院生药学教研室鉴定为百合科植物麦冬(Ophiopogonjaponicus(Thunb)Ker—Gawl)的果实，对照品薯蓣皂苷元来源于江苏省中G科学院植物研究所药用植物研究中心，5％香草醛溶液(0．59香草醛溶于10mL冰醋酸；新鲜配制)，其他试剂均为分析纯。
2实验与方法
2．1对照品溶液的制备
精密称取干燥**恒重的薯蓣皂苷元对照品
15．00rag，加适量甲醇溶解，置于10mL容量瓶中，用甲醇定容**刻度，摇匀。精密吸取1．0mL置于100mL容量瓶中，用甲醇定容**刻度，摇匀，制备成浓度为15／-g／mL的对照品溶液，备用。
2．2供试品溶液的制备
称取干燥的麦冬果实粉末2．59，置于100mL圆底烧瓶中，加入50mL 70％乙醇，于90℃水浴中回流提取2h，提取2次，抽滤，滤液减压浓缩得浸膏。将浸膏用适量水溶解，依次用氯仿、水饱和正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压浓缩得总皂苷浸膏。向总皂苷浸膏中加入25mL 15％的硫酸溶液，于沸水浴中回流水解3h，冷却**室温，转移**分液漏斗中，用氯仿萃取3次，合并氯仿萃取液，浓缩得总皂苷元浸膏。将总皂苷元浸膏用甲醇溶解，定容**100mL，得供试品溶液，备用。
2．3测定波长的选择
分别精密吸取对照品溶液、样品溶液各1．0mL，置于10mL具塞试管中，挥尽溶剂，分别加入5％香草醛溶液0．2mL和高氯酸0．8mL，于70℃水浴上不蜥振摇保温20min，冰浴冷却，加冰醋酸稀释**刻度，立即在紫外分光光度计于200～900nm区间扫描，同时空白溶液作参比。对照品及供试品的**大吸收波长均在453nm，因此选取453nm作为检测波长。
2．4标准曲线的制备
分别精密吸取对照品溶液1．5，2．0，3．0，4．0，
5．OraL，置于5个10mL具塞试管中，挥尽溶剂，分别加入5％香草醛溶液0．2mL和高氯酸0．8mL，置70℃水浴上不断振摇保温20min，冰浴冷却，加冰醋酸稀释**刻度，摇匀，备用。以5％香草醛溶液0．2mL和高氯酸0．8mL，加冰醋酸稀释**刻度的溶液为空白，在453nm处测定吸收度。以浓度C(t-g／mL)为横坐标，吸收度A为纵坐标，绘制标
准曲线。经线性回归分析处理得到回归方程为：A一0．0492C+0．044(r=0．999)。
说明吸光度与对照品浓度在2．25弘g／mL～7．5／-g／mL范围内呈良好的线性关系。
2．5精密度试验
精密吸取对照品溶液2．OraL**lOmL具塞试管中，按“2．4”项下方法显色测定吸收度，连续测定5次，结果RSD为0．093％，可见仪器精密度良好。
2．6稳定性试验
精密吸取对照品溶液5．OmL，置lOmL具塞试管中，按“2．4”项下方法显色，并分别在显色后的0，5，10，15，20min测定其吸光度，结果RSD为0．454％，可见本法在显色后20 min内，吸光度值是比较稳定的，测定**好在20min内完成。
2．7重现性试验
取药材粉末5份，每份约2．59，按照“2．2样品溶液的制备”步骤，平行制备样品溶液，各吸取1．0mL**5个10mL具塞试管中，按“2．4”项下方法显色测定吸收度，结果样品中总皂苷元平均含量为0．24％，RSD为0．4％。表明方法重现性良好。
2．8加样回收率试验
取已知含量的药材粉末6份，每份约0．59，分别加入1．5mg／mL的对照品溶液0．8mL，按照“2．2样品溶液的制备”步骤，平行制备样品溶液，各精密吸取样品溶液2．0mL置于6个10mL具塞试管中，按“2．4”项下方法显色测定吸收度，结果见表1。
2．9样品含量测定
分别取采集于向阳山坡地、楼后背阴处的两批药材2．59，依“2．2”项下方法制备供试品溶液，各精密吸取1．OmL，依“2．4”项下方法显色测定吸收度，带入标准曲线公式，计算其总皂苷元平均含量分别为0．24％、0．29％。
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