手工分离浓缩血小板(PC)的制备

.富含血小板血浆(PRP)法分离制备血小板法(富浆法)

    先将全血经轻离心,分离制备富含血小板血浆,之后将富含血小板血浆重离心,移去上层血浆,下层沉淀即为浓缩血小板。在第二次重离心制备浓缩血小板前,可将**次轻离心获得的富含血小板血浆进行白细胞过滤处理。具体操作如下:
1.采血
2.轻离心成分分离制得红细胞、富含血小板血浆。
    建议离心条件:温度:22℃±2℃,加速:9 r/min,减速:3 r/min,200ml袋离心力为478g,400ml袋离心力为850g,离心时间为8分钟。(贺利氏离心机)
    轻离心,使红细胞(RBC)、白细胞(WBC)沉淀,上层血浆的大部分血小板(PLT)尚未沉淀,分离此血浆即为富含血小板血浆,约含全血中70%的PLT(根据调节离心机的离心力和时间有所不同)。
3.重离心富含血小板血浆。
第二次离心:温度:22℃±2℃,加速:9 r/min,减速:3 r/min,离心力2988g,离心时间为10分钟。浓缩血小板1个单位留浆20-25ml,2个单位留浆30-45ml。
4.挤去上层贫血小板血浆, 再回部分贫血小板血浆置血小板内, 形成血小板悬液,静置1.5-2h;8h内制备必须完毕。
5.血小板悬液振荡保存,等待检测报告,不合格剔除。
6.根据需求选择合格血小板悬液进行汇集过滤。
7.开放式6h内输完。
8.密闭式振荡保存(无菌接驳,血小板贮存袋,细菌监测)。 
 
富浆法的特点:PRP-PC质量不稳定,WBC残留量高,输洼安全性差 ,反复输注常会诱发血小板输注无效。
 
Ⅱ.白膜(BC)法分离制备血小板法
全血首先经重离心后分离白膜层,将白膜层再经轻离心后,去除红细胞和白细胞,即得浓缩血小板。具体操作如下:
1.采血
2.成分分离并制备白膜得少白红细胞(白细胞去除率约85 %)、血浆、白膜。
   建议离心条件:温度:22℃±2℃,400ml袋离心力转速2515转/2100g,离心时间为14分钟。
3.分离白膜层,约含全血中90%的PLT,室温静置**少4h,可保存24h。
   目视挑选白膜,发生了凝聚及白膜太薄者予以淘汰,不用于制备浓缩血小板。
4.白膜置于血小板保存箱过夜但不振荡,同时等待病毒等检测结果
5.等待血小板需求,根据需求选择合格白膜进行汇集血小板的制备。将10-12单位(5-6袋)白膜混合,总重约500-580ml,充分混匀。
6.轻离心
   离心条件:温度:22℃±2℃,400ml袋离心力转速800转/212g,离心时间为10分钟。
注:装杯时汇集袋两侧夹硬纸板固定,使汇集袋平整。
7.分出上清液,即为汇集浓缩血小板,经血小板滤器过滤,得汇集少白细胞浓缩血小板。
8.血小板发放;细菌监测。
 
白膜法的特点:优点是血小板中白细胞残留量较低,输注安全性好,血小板膜表面CD62p的表达率显著降低,提高了总ATP水平和低渗性休克反应的能力。缺点是血小板含量低。