液相色谱测定双酚A

摘 要:由于双酚A在水样中通常为微量甚**痕量级,且水样基体复杂,干扰物多,往往难以直接测定,必须经过样品富集处理(包括萃取、洗脱、净化、浓缩、定容等步骤)后才可进行分析, 本实验采用了高效液相色谱法对水样中双酚A的测定。 

关键词: 双酚A; 高效液相色谱; 水样。
    
  双酚A(BPA)是一种重要的有机化工原料主要用于生产环氧树脂 、聚碳 酸酯 、聚砜树脂的单体 ;又可用作酚醛树脂 、可塑性树脂的生产原料和橡胶 、塑料 、农药 、油漆 、油墨等的抗氧化剂及稳定剂 ;在食具 、食品包装材料 、塑料制品 、防腐涂料 、外科修补术用的填充物 、输配水及贮水材料 等方面应用广泛¨。  BPA在一定条件下会因溶出 、迁移 、排放及事故等原因进入水体 。研究表明BPA不仅对水生生物有急性毒性 ,而且还具有雌激素的特性 ,是环境内分泌干扰物之一 ,可影响人或动物的中枢神经系统和生殖免疫系统 ,降低人或动物的生殖繁衍能力 ,并被怀疑诱发生殖系统和心血管系统的癌变等 。 因此 ,水样BPA的测定具有十分重要的意 义 。
目前,水样中BPA的常规测方法主要有气相色谱一质谱联用法(GC—MS) 、液相色谱一质谱联用法(LC—MS) 、液相色谱一多级质谱联用法(LC—MS—MS)以及高分辨色谱一高分辨质谱法(HRGC/LC —HRMS)No]等,Gomes… 、任仁¨ 、赵利霞等先后对此进行了评述 。基于色谱或色 一质联机的BPA检测方法灵敏度高 、选择性好,因此,本实验采用高效液相色谱法测定水中的双酚A。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
高效液相色谱有高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚**在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到**佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
色谱柱还有可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
  1. 实验部分
  1.1 仪器及试剂
  主要仪器:Agilent1200液相色谱,固相萃取装置 ,天平,旋转蒸发仪,氮气吹干仪,PH计,冷冻干燥机 。
    试剂: BPA标准品,乙腈、甲醇、正己烷、二氯甲烷、四氯化碳、均为色谱纯,高纯水。
  1.2 标准溶液的配制
  称取0.1 g的BPA,配制成500 mg·L-1BPA甲醇储备液,保存于4℃冰箱待用。实验时逐级稀释配制成低浓度的BPA水溶液。
1.3 环境样品的采集
水样采集后立即放入2-8℃保温箱中保存。
1.4 液相色谱分析条件
色谱柱: 30m×0.25mm(内径) ×0.25μm(膜厚),HP-5MS固定相;
柱温:80℃(保持1min),以20℃/min,**300℃(保持3 min);
进样口温度:250℃;
色谱/质谱接口温度:280℃;
载气:氦气,纯度>99.99%, 柱流量1.0mL/min;
流速:1ml/min   
进样量:5μL
比例相:90%
1.5 工作曲线
  称取0.1009g BPA固体粉末溶解于甲醇中,定容**100mL作为储备液后用流动相逐级稀释,配制成一系列浓度的双酚A对照溶液,进行测定。以峰面积对浓度作图,得到工作曲线如下表。线性方程为 y = 4.5138x +12.7962,线形相关系数为:R2 =0.99993。
  2.水样的前处理
水样采用液-液萃取法。将水样过0.45μm滤膜,量取1L倒入分液漏斗中,分次加入30、30、20 mL CH2C12,摇匀,合并萃取液,后用旋转蒸发仪浓缩到约0.5 mlmL,氮气吹干,用甲醇定容到1mL,4℃下保存,备用。
 3.环境样品中BPA含量的测定
温度:25 ℃  流速:1ml/min   进样量:5μL  浓度:1ppm
比例相 80% 85% 90% 93% 95%
出峰时间 5.031 4.147 3.652 3.439 3.363
峰面积 4953.2 4727.4 4635.6 4648.6 4680.8
峰高 752.5 841.3 842.6 685.5 636.3
峰宽 0.1008 0.0856 0.0842 0.1041 0.1098